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Thermo Fisher Scientific的ProFlex 2x96梯度PCR儀可以進(jìn)行24小時連續(xù)運行,但前提是需要遵循正確的操作規(guī)范,并考慮到實驗的具體需求。詳細(xì)解釋如下:
一、賽默飛ProFlex2x96梯度PCR系統(tǒng)設(shè)備本身的設(shè)計能力
1、工業(yè)級部件與穩(wěn)定設(shè)計:Thermo賽默飛的PCR儀,尤其是像ProFlex這樣的中高級型號,其硬件(如半導(dǎo)體熱循環(huán)模塊、電源、控制系統(tǒng))都是按照長時間穩(wěn)定運行的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計和制造的。它們被廣泛應(yīng)用于需要高通量、過夜運行甚至連續(xù)數(shù)天運行的核心實驗室和測序中心。
2、熱循環(huán)耐久性:儀器進(jìn)行的升降溫循環(huán)(Cycling)本身就是其核心功能。連續(xù)運行24小時(例如,進(jìn)行多個長程序或背靠背實驗)在其正常工作負(fù)載范圍內(nèi)。
3、內(nèi)置保護(hù)機(jī)制:設(shè)備具有過熱保護(hù)、電源異常監(jiān)測等安全功能,為長時間運行提供保障。
二、賽默飛ProFlex2x96梯度PCR系統(tǒng)連續(xù)運行時必須注意的關(guān)鍵點
雖然設(shè)備能力上允許,但為了確保實驗成功和設(shè)備壽命,您需要注意以下幾點:
1、程序總時長的預(yù)估:精確計算您的PCR程序所需的總時間(包括熱蓋預(yù)熱、初始變性、循環(huán)、最終延伸)。確保24小時內(nèi)能完整完成您的實驗程序,避免程序在無人值守時中斷。
2、熱蓋和樣品蒸發(fā):務(wù)必開啟熱蓋功能,并將溫度設(shè)置為推薦值(通常對于0.2mL管是105°C)。這是防止長時間運行中管內(nèi)樣品蒸發(fā)的最關(guān)鍵措施。
3、電源穩(wěn)定:將儀器連接到穩(wěn)定、不間斷的電源,避免因意外斷電導(dǎo)致程序中斷和樣品損失。如果實驗室電壓不穩(wěn),建議使用穩(wěn)壓器。
4、散熱空間:確保儀器周圍有足夠的散熱空間(前后左右至少留出20-30厘米),背部通風(fēng)口不被堵塞。連續(xù)運行會產(chǎn)生大量熱量,良好的散熱至關(guān)重要。
5、樣品與程序的匹配性:對于超長運行時間(例如超過18小時),需要評估您的DNA聚合酶和反應(yīng)體系是否能夠保持長時間活性。有些特殊的超保真或長片段酶更適合長時間循環(huán)。
6、儀器狀態(tài)檢查:在啟動長時間運行前,快速檢查儀器是否有報錯歷史,確認(rèn)熱蓋平整清潔,確保樣品板或管放置平整。
三、超過單次程序24小時的考慮
1、背靠背連續(xù)運行:如果您需要連續(xù)運行多個程序超過24小時(例如,一個程序15小時,緊接著第二個程序10小時),ProFlex可以勝任。您可以使用儀器的程序鏈接功能或設(shè)置預(yù)約啟動時間。同樣,必須確保熱蓋全程開啟,并考慮散熱。
2、儀器壽命與維護(hù):像任何精密儀器一樣,長期高負(fù)荷運行會加速部件(如半導(dǎo)體模塊)的老化。遵循定期的校準(zhǔn)和維護(hù)計劃(特別是溫度校準(zhǔn))對于保證長時間運行下的結(jié)果準(zhǔn)確性至關(guān)重要。
四、實踐建議:
1、程序測試:對于一個新的超長程序,如果可能,先在白天進(jìn)行一次短時間測試,確認(rèn)儀器運行正常,程序設(shè)置無誤。
2、清晰標(biāo)識:在儀器上貼上便簽,注明運行者、程序名稱、預(yù)計結(jié)束時間及緊急電話。
3、遠(yuǎn)程監(jiān)控(如果具備條件):有些實驗室的PCR儀聯(lián)網(wǎng)后,可以通過軟件遠(yuǎn)程監(jiān)控運行狀態(tài)。
4、合理安排:盡量將超長程序安排在夜間或周末運行,以提高設(shè)備使用效率。
結(jié)論:
請放心地將您的ProFlex PCR儀用于24小時連續(xù)實驗。只要您確保開啟熱蓋、提供良好散熱、電源穩(wěn)定,并提前規(guī)劃好實驗程序,該儀器是非??煽康?。這也是現(xiàn)代PCR儀設(shè)計的常規(guī)應(yīng)用場景之一。