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技術(shù)文章Bio-Rad伯樂(lè)CFX DUET實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)可以進(jìn)行24小時(shí)連續(xù)運(yùn)行。
實(shí)際上,這正是實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的設(shè)計(jì)用途之一。許多標(biāo)準(zhǔn)的qPCR程序,從加樣、升降溫循環(huán)到最終數(shù)據(jù)分析,本身就需要2到4個(gè)小時(shí)。對(duì)于一些復(fù)雜的程序(如高分辨率熔解曲線分析)或反應(yīng)體系優(yōu)化不佳導(dǎo)致需要更長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間的情況,運(yùn)行時(shí)間超過(guò)5-6小時(shí)也很常見(jiàn)。因此,儀器在設(shè)計(jì)時(shí)就已經(jīng)考慮到了長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定運(yùn)行的需求。以下是關(guān)于CFX DUET進(jìn)行24小時(shí)運(yùn)行的詳細(xì)說(shuō)明和注意事項(xiàng):
一、伯樂(lè)CFC DUET實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)支持24小時(shí)運(yùn)行的特性:
1、穩(wěn)定的溫控系統(tǒng):CFX DUET采用帕爾貼熱電溫控技術(shù),能夠在長(zhǎng)時(shí)間的循環(huán)過(guò)程中保持精確和穩(wěn)定的溫度控制,確保反應(yīng)的特異性和效率。
2、可靠的硬件設(shè)計(jì):其光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)和電子元件都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格測(cè)試,能夠保證在持續(xù)工作下的可靠性。
3、軟件支持:CFX Maestro軟件允許用戶設(shè)置長(zhǎng)時(shí)間、復(fù)雜的擴(kuò)增程序,并且可以在運(yùn)行結(jié)束后自動(dòng)保存數(shù)據(jù)并關(guān)機(jī),支持無(wú)人值守的運(yùn)行模式。
二、伯樂(lè)CFX DUET實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行時(shí)的重要注意事項(xiàng):
1、儀器放置環(huán)境:
(1)電源:確保連接到一個(gè)穩(wěn)定、不間斷的電源。避免使用經(jīng)常跳閘或電壓不穩(wěn)的電路。如果條件允許,可以考慮使用UPS(不間斷電源)以防萬(wàn)一。
(2)通風(fēng):儀器周圍必須留有足夠的散熱空間(建議左右和后側(cè)至少保留10-15厘米的空隙)。不要將其放置在密閉空間或靠近熱源的地方。
(3)清潔:保持儀器所在環(huán)境的清潔,避免灰塵堵塞風(fēng)道,影響散熱。
2、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備:
(1)反應(yīng)板密封:這是至關(guān)重要的一步。務(wù)必使用光學(xué)級(jí)封板膜,并確保將其密封嚴(yán)實(shí),防止在長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過(guò)程中反應(yīng)液蒸發(fā),這會(huì)導(dǎo)致孔間濃度不均、熒光值異常,甚至實(shí)驗(yàn)失敗。
(2)程序驗(yàn)證:在正式進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行前,先用一個(gè)短程序測(cè)試一下您的實(shí)驗(yàn)體系和儀器狀態(tài)是否正常。
(3)耗材質(zhì)量:使用高質(zhì)量的96孔板或8聯(lián)管,確保其與儀器的熱蓋接觸良好,能有效壓迫液面,防止蒸發(fā)。
3、運(yùn)行期間:
(1)雖然可以無(wú)人值守,但建議在程序開始運(yùn)行一段時(shí)間后(例如,一個(gè)循環(huán)結(jié)束后)通過(guò)軟件遠(yuǎn)程檢查一下儀器的狀態(tài)和擴(kuò)增曲線是否正常。
(2)確保實(shí)驗(yàn)室門禁或管理不會(huì)導(dǎo)致您在需要時(shí)無(wú)法進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室處理后續(xù)事宜。
三、總結(jié)
Bio-Rad CFX DUET有能力且被設(shè)計(jì)用于進(jìn)行24小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間的連續(xù)運(yùn)行。 只要您確保電源穩(wěn)定、散熱良好,并且在實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備階段(特別是封板)做好,就可以放心地讓儀器自動(dòng)完成實(shí)驗(yàn)。
如果您計(jì)劃進(jìn)行的是極其關(guān)鍵或珍貴的樣本實(shí)驗(yàn),進(jìn)行一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證整個(gè)流程的穩(wěn)定性總是一個(gè)好習(xí)慣。