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伯樂(Bio-Rad)CFX Opus 96 實時熒光定量PCR系統(tǒng)是一款非常精密和可靠的儀器。為了確保其長期穩(wěn)定運行、獲得準(zhǔn)確可靠的實驗數(shù)據(jù),日常的維護(hù)保養(yǎng)至關(guān)重要。以下是針對CFX Opus 96的詳細(xì)日常維護(hù)保養(yǎng)指南,分為 每日/每次使用后、每周/定期 和 深度清潔 三個部分。
一、伯樂CFX Opus 96實時熒光定量PCR儀每日/每次使用后維護(hù)
這些步驟應(yīng)在每次運行完P(guān)CR程序后執(zhí)行,是預(yù)防污染和保持儀器性能的基礎(chǔ)。
1、清潔樣品槽模塊
(1)目的: 防止殘留的礦物油、蒸發(fā)冷凝物或偶然灑落的樣品污染后續(xù)實驗。
(2)步驟:
待儀器冷卻至室溫后,打開機蓋。
使用無塵棉簽或壓縮空氣。
(3)推薦方法: 用無菌水或70%乙醇浸濕無塵棉簽(注意:不要過量滴液,以擠不出液體為宜),輕輕擦拭每個樣品孔的底部和側(cè)壁。然后換用干棉簽擦干,或等待其自然蒸發(fā)。
(4)替代方法: 使用實驗室專用的壓縮空氣罐,從各個角度吹掃樣品孔,以去除灰塵和纖維。
注意: 嚴(yán)禁使用強酸、強堿、高濃度有機溶劑或粗糙的紙巾/布料擦拭,以免刮傷或腐蝕樣品槽表面。
2、清潔儀器外殼和機蓋
(1)目的: 保持外觀整潔,防止外部污染物被帶入儀器內(nèi)部。
(2)步驟:
用柔軟的濕布蘸取少量中性清潔劑或70%乙醇,擦拭儀器外殼、機蓋(特別是內(nèi)側(cè))和控制面板。
確保布只是微濕,切勿讓任何液體流入儀器內(nèi)部或縫隙中。
用干布擦干。
3、檢查并清空廢液槽
(1)目的: CFX Opus 96在運行時會有一個小風(fēng)扇幫助散熱,可能會在內(nèi)部產(chǎn)生少量冷凝水,收集在廢液槽中。
(2)步驟:
定期檢查儀器后部或底部的廢液槽(請參考用戶手冊確認(rèn)具體位置)。
如果發(fā)現(xiàn)有液體,及時將其倒掉并清潔干凈。
二、伯樂CFC Opus 96實時熒光定量PCR系統(tǒng)每周/定期維護(hù)
如果儀器使用頻率很高,建議每周進(jìn)行一次。
1、運行背景校正校準(zhǔn)
(1)目的: 校準(zhǔn)光學(xué)檢測系統(tǒng),確保所有通道(如FAM, HEX, ROX, Cy5等)的基線背景值準(zhǔn)確。這對于低豐度基因的準(zhǔn)確定量尤其重要。
(2)步驟:
在CFX Maestro軟件中,找到“Instrument"或“Maintenance"選項卡。
選擇運行“Background Calibration"或類似選項。
按照屏幕提示進(jìn)行操作。注意: 運行校準(zhǔn)時,樣品槽必須是空的且保持清潔干燥。
建議每月至少執(zhí)行一次,或在更換光源、進(jìn)行重大維修后必須執(zhí)行。
2、進(jìn)行光學(xué)檢驗
(1)目的: 快速檢查所有LED光源和檢測器是否工作正常。
(2)步驟:
在軟件維護(hù)菜單中,選擇運行“Optical Test"。
儀器會快速掃描所有熒光通道。檢查測試結(jié)果報告,確認(rèn)所有通道均通過(PASS)。如果某個通道失敗,請聯(lián)系伯樂技術(shù)支持。
3、全面清潔和檢查
執(zhí)行一次比日常更的樣品槽和外殼清潔。
檢查電源線、數(shù)據(jù)線是否連接牢固,有無破損。
三、深度清潔與特殊情況處理
1、污染物灑落處理
(1)情況: 如果發(fā)生PCR反應(yīng)液或染料灑落到樣品孔中。
(2)措施:
立即停止當(dāng)前運行的程序(如果正在運行)。
待儀器冷卻后,立即用含10%漂白劑(次氯酸鈉)的棉簽進(jìn)行初步擦拭,以降解DNA/RNA。
然后用70%乙醇棉簽多次擦拭,以去除漂白劑殘留和有機污染物。
最后用無菌水棉簽擦拭,并用干棉簽擦干。
嚴(yán)重污染時,可能需要運行多個空白PCR循環(huán)(只加水)以驗證清潔效果。
2、使用去污染液
如果懷疑有氣溶膠或擴增子污染,可以使用商業(yè)化的PCR去污染劑(如DNA-OFF™, DNA-Zap™等),按照產(chǎn)品說明書對樣品槽和機蓋內(nèi)部進(jìn)行處理。處理后務(wù)70%乙醇或無菌水清除去污染劑殘留。
四、維護(hù)保養(yǎng)注意事項總結(jié)
1、安全重要: 在進(jìn)行任何清潔維護(hù)前,務(wù)必關(guān)閉儀器電源并拔掉電源插頭(簡單的日常外殼擦拭除外)。待加熱模塊冷卻后再操作,以防燙傷。
2、溫和清潔: 始終使用溫和的清潔劑(70%乙醇、中性清潔劑)。避免使用丙酮、強酸、強堿等腐蝕性溶劑。
3、防止液體進(jìn)入: 確保清潔工具(布、棉簽)不會滴落液體到儀器內(nèi)部。
4、使用正確耗材: 始終使用伯樂推薦或認(rèn)證的96孔板/八聯(lián)管和光學(xué)封板膜。不匹配的耗材可能導(dǎo)致傳熱不均、密封不嚴(yán)或熒光信號異常。
5、環(huán)境要求: 將儀器放置在穩(wěn)固、水平、無震動的臺面上。避免陽光直射、遠(yuǎn)離熱源、強磁場和腐蝕性氣體。保持環(huán)境清潔,濕度適宜。
6、定期校準(zhǔn): 嚴(yán)格遵守推薦的校準(zhǔn)周期,這是保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的核心。
7、記錄: 建立維護(hù)日志,記錄每次維護(hù)的日期、內(nèi)容和發(fā)現(xiàn)的問題,便于追蹤和故障排查。