NanoDrop One是一款功能強(qiáng)大、操作簡便的微體積樣品分析儀器，它革新了傳統(tǒng)光度計(jì)需要比色皿的繁瑣操作，僅需1-2 μL的樣品即可完成快速、準(zhǔn)確的測量。它集成了多種檢測模式于一身，是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室得力工具。以下是其核心的檢測功能：

一、賽默飛NanoDrop One 核酸定量

1、檢測類型：雙鏈DNA (dsDNA), 單鏈DNA (ssDNA), RNA, 寡核苷酸。

原理：利用核酸在260 nm波長處有吸收峰的特性（根據(jù)朗伯-比爾定律）進(jìn)行定量。

2、關(guān)鍵指標(biāo)：

濃度：直接給出樣品濃度（ng/μL）。

純度：通過計(jì)算吸光度比值來評估樣品純度：

A260/A280比值：用于評估蛋白質(zhì)污染。理想值：~1.8 (DNA), ~2.0 (RNA)。比值偏低表明可能存在蛋白質(zhì)污染。

A260/A230比值：用于評估鹽類、胍鹽、EDTA或碳水化合物等污染。理想值通常 >2.0。比值偏低表明存在有機(jī)溶劑或鹽類殘留。

3、優(yōu)勢：無需稀釋，直接測量原始樣品，快速（數(shù)秒出結(jié)果），節(jié)省珍貴樣品。

二、賽默飛紫外-可見全光譜掃描

NanoDrop One可以生成190nm至840nm的完整光譜圖，這對于樣品鑒定和純度評估至關(guān)重要。

應(yīng)用：

1、鑒定未知樣品：通過光譜形狀判斷是核酸、蛋白還是其他化合物。

2、深入評估純度：全光譜可以揭示其他污染物（如苯酚、胍鹽）的特征吸收峰，這些是260/280和260/230比值無法全面反映的。

3、檢測顆粒物散射：光譜基線抬升通常意味著樣品中存在不溶性顆?；驓馀?。

三、蛋白質(zhì)定量

NanoDrop One內(nèi)置了多種常用的蛋白質(zhì)定量方法（A280模式）。

1、檢測原理：

A280直接檢測：利用蛋白質(zhì)中的色氨酸 (Trp) 和酪氨酸 (Tyr) 在280 nm處的吸收來定量。該方法需要已知消光系數(shù)。

比色法方法：儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，可用于：

微BCA法 (Micro BCA)：靈敏度高，抗去垢劑干擾能力強(qiáng)。

Bradford法：快速，但易受去垢劑干擾。

2、優(yōu)勢：與核酸一樣，僅需微量樣品即可快速獲得濃度結(jié)果（mg/mL）。

四、賽默飛熒光定量

這是一個(gè)可選配的功能模塊，大幅擴(kuò)展了NanoDrop One的應(yīng)用范圍，特別是對低濃度樣品的檢測。

1、原理：使用特定的熒光染料，通過激發(fā)光激發(fā)染料發(fā)出熒光，檢測熒光強(qiáng)度來定量，其靈敏度比紫外吸收法高幾個(gè)數(shù)量級。

2、應(yīng)用：

超低濃度核酸定量：如使用Quant-iT™ dsDNA HS 或 RNA HS assays，可檢測低至 pg/μL 級別的核酸，適用于下一代測序 (NGS) 文庫質(zhì)檢、單細(xì)胞分析等。

特異性檢測：某些染料只對特定類型的核酸（如雙鏈DNA）有強(qiáng)熒光信號，特異性更好。

五、賽默飛NanoDrop One的突出特點(diǎn)：

1、智能化與自動(dòng)化：配備觸摸屏和智能軟件，可自動(dòng)選擇光程、保存光譜數(shù)據(jù)、生成報(bào)告。

2、樣品留存：測量后的樣品可以回收，用于下游實(shí)驗(yàn)。

3、快速高效：每個(gè)樣品測量僅需幾秒鐘，無需清洗比色皿，極大提升了工作效率。

總而言之，賽默飛NanoDrop One不僅僅是一臺核酸濃度儀，它是一個(gè)功能高度集成的微體積全光譜分析平臺，能夠滿足現(xiàn)代生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室對樣品質(zhì)量控制的多樣化需求。