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PCR 儀全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀(Polymerase Chain Reaction Instrument),是一種用于體外擴(kuò)增特定 DNA 片段的儀器設(shè)備,在分子生物學(xué)等眾多領(lǐng)域有著極為重要的應(yīng)用,以下為你詳細(xì)介紹它的相關(guān)情況:
一、工作原理
它基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的原理來運(yùn)行。PCR 反應(yīng)主要包括高溫變性、低溫退火、適溫延伸這三個基本步驟的循環(huán)過程。在高溫(通常 90℃-95℃)下,雙鏈 DNA 解旋變?yōu)閱捂湥唤又谙鄬Φ蜏兀ㄒ罁?jù)引物的不同而有差異,一般 50℃-65℃左右)條件下,引物與單鏈 DNA 模板特異性結(jié)合(退火);然后在合適的溫度(70℃-75℃左右)下,DNA 聚合酶以引物為起始點(diǎn),按照模板鏈的堿基序列合成新的互補(bǔ)鏈,經(jīng)過多次這樣的循環(huán),目的 DNA 片段就可以得到大量復(fù)制、擴(kuò)增。
二、基本構(gòu)造
1、溫度控制系統(tǒng):這是 PCR 儀的關(guān)鍵部分,能精準(zhǔn)且快速地按照設(shè)定要求改變反應(yīng)體系的溫度,實(shí)現(xiàn)變性、退火、延伸等不同溫度階段的切換,保障 PCR 反應(yīng)順利進(jìn)行。其控溫方式包括加熱模塊(如電阻絲、半導(dǎo)體等)以及制冷組件(像壓縮機(jī)、半導(dǎo)體制冷片等)。
2、反應(yīng)模塊:是放置 PCR 反應(yīng)管或反應(yīng)板的地方,有不同的規(guī)格和形式,常見的有 96 孔、384 孔等,以適應(yīng)不同通量的實(shí)驗(yàn)需求。
3、控制系統(tǒng)和顯示界面:使用者可以通過控制系統(tǒng)來設(shè)定反應(yīng)的溫度、時(shí)間、循環(huán)次數(shù)等各項(xiàng)參數(shù),并且能在顯示界面查看反應(yīng)的實(shí)時(shí)狀態(tài)以及相關(guān)參數(shù)信息等。
三、主要作用
1、科研方面:幫助科研人員從微量的 DNA 樣本中擴(kuò)增出足夠量的目的 DNA 片段,便于后續(xù)進(jìn)行基因克隆、測序、基因表達(dá)分析、基因多態(tài)性研究等諸多實(shí)驗(yàn)操作,是探索基因奧秘、開展遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等眾多學(xué)科研究重要的工具。PCR 儀擴(kuò)增
2、醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域:比如在檢測病原體(像新冠病毒、乙肝病毒等)時(shí),即使患者體內(nèi)病原體含量很低,也可通過 PCR 儀擴(kuò)增其核酸片段,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的診斷;還能用于一些遺傳性疾病的基因檢測、腫瘤相關(guān)基因檢測等,輔助醫(yī)生制定治療方案。
3、法醫(yī)學(xué)應(yīng)用:可對現(xiàn)場遺留的微量生物樣本(如毛發(fā)、血跡等)中的 DNA 進(jìn)行擴(kuò)增,為案件的偵破、身份鑒定等4、提供關(guān)鍵的遺傳學(xué)證據(jù)。
食品檢測方面:檢測食品中是否存在有害微生物、轉(zhuǎn)基因成分等,保障食品安全。
總之,PCR 儀憑借其能高效擴(kuò)增 DNA 片段的功能,在眾多領(lǐng)域都發(fā)揮著極為關(guān)鍵的作用,推動了相關(guān)學(xué)科和行業(yè)的不斷發(fā)展。