在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，
賽默飛Proflex梯度PCR儀憑借其性能占據(jù)著重要地位。熟練掌握其特點(diǎn)與操作技巧，對提升實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性意義重大。
一、儀器特點(diǎn)
?。ㄒ唬╈`活的模塊化設(shè)計
Proflex梯度PCR儀提供多達(dá)五種可更換的加熱模塊。研究人員可按需選擇，如3×32孔獨(dú)立模塊，能同時運(yùn)行三個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，互不干擾；雙96孔或雙384孔模塊滿足高通量測序需求；雙槽式模塊則支持特定數(shù)字芯片。這種模塊化設(shè)計大大增強(qiáng)了儀器的適用性，無論是少量樣本的精細(xì)實(shí)驗(yàn)，還是大規(guī)模的高通量篩查，都能輕松應(yīng)對。
（二）先進(jìn)的VeriFlex加熱塊技術(shù)
創(chuàng)新的VeriFlex加熱塊由六個獨(dú)立的peltier加熱塊組成。在PCR優(yōu)化過程中，每個加熱塊可獨(dú)立設(shè)定特定溫度值，實(shí)現(xiàn)精確控溫，極大提高了優(yōu)化效率。并且，六塊peltier加熱塊能同時運(yùn)行多達(dá)六種不同的退火溫度或六個引物對，讓科研人員能在一次實(shí)驗(yàn)中探索多種反應(yīng)條件，快速找到最佳實(shí)驗(yàn)參數(shù)。
?。ㄈ┍憬莸倪h(yuǎn)程操作功能
借助免費(fèi)的移動應(yīng)用程序或ThermoFisherCloud，科研人員能在任意地點(diǎn)遠(yuǎn)程連接儀器。無論身處辦公室、家中，還是外出參加會議，都可隨時查看儀器運(yùn)行狀態(tài)、獲取模塊可用性通知，甚至遠(yuǎn)程編輯和上傳實(shí)驗(yàn)程序。這一功能打破了空間限制，為忙碌的科研工作帶來了極大便利。
?。ㄋ模┚珳?zhǔn)的溫控系統(tǒng)
儀器具備出色的溫控精度，溫度均勻性高，變溫速率快。在PCR反應(yīng)關(guān)鍵的變性、退火、延伸步驟中，能迅速且精準(zhǔn)地達(dá)到并維持設(shè)定溫度，確保反應(yīng)的高效性與穩(wěn)定性。即使處理復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)需求，也能保障結(jié)果的可靠性與重復(fù)性。
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Proflex配備全新的8.4英寸彩色觸摸屏，圖形用戶界面直觀易懂。實(shí)驗(yàn)人員可通過簡單觸摸操作，快速完成實(shí)驗(yàn)程序的創(chuàng)建、編輯與運(yùn)行，極大降低了操作門檻。同時，熱學(xué)模擬模式能模擬多種舊型號PCR儀的變溫速率，方便習(xí)慣舊儀器的用戶快速上手，實(shí)現(xiàn)無縫過渡。
二、操作技巧
?。ㄒ唬?shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
仔細(xì)檢查儀器外觀，確保無損壞。連接好電源，開機(jī)等待儀器完成初始化。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，精確配置PCR反應(yīng)混合物，注意各組分添加順序與量的準(zhǔn)確性，避免產(chǎn)生氣泡。
選擇適配的PCR管或孔板，將反應(yīng)混合物小心加入，確保每管或每孔體積一致，隨后放入儀器加熱模塊，注意放置穩(wěn)固。
?。ǘ┏绦蛟O(shè)置
點(diǎn)擊觸摸屏“NewMethods”，若有合適模板可選擇“opentemplate”創(chuàng)建程序，否則選“BlankTemplate”，再選“GeneralPCR”進(jìn)入設(shè)置界面。
精準(zhǔn)設(shè)置溫度、時間、熱蓋溫度、反應(yīng)體積及循環(huán)數(shù)等參數(shù)。如需添加或刪除步驟、階段，點(diǎn)擊“ManageStages”進(jìn)行操作。
若需使用梯度功能，點(diǎn)擊“AdvancedOptions”中的“VeriFlex”，合理設(shè)置梯度范圍，一般相鄰梯度間隔0.1-5℃，以篩選最佳退火溫度。
?。ㄈ┻\(yùn)行與監(jiān)控
程序設(shè)置完成并確認(rèn)無誤后，保存程序，選擇要使用的加熱模塊，點(diǎn)擊“StartRUN”啟動實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)運(yùn)行中，通過觸摸屏實(shí)時監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)度與溫度曲線，關(guān)注儀器有無異常報警。若需暫停、繼續(xù)或停止實(shí)驗(yàn)，可點(diǎn)擊相應(yīng)按鈕操作。
（四）實(shí)驗(yàn)后處理
反應(yīng)結(jié)束，打開熱蓋，小心取出樣本，及時清理儀器內(nèi)部，防止殘留試劑污染。
關(guān)閉儀器電源，保持儀器清潔，定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn)與維護(hù)，確保長期穩(wěn)定運(yùn)行。
賽默飛Proflex梯度PCR儀以其強(qiáng)大特點(diǎn)為科研助力，熟練運(yùn)用操作技巧，能讓儀器發(fā)揮最大效能，為分子生物學(xué)研究提供有力支持。
